Молекулярные цитогенетические методы

Что такое молекулярные цитогенетические методы?

Молекулярная цитогенетика представляет собой численное и структурное исследование хромосом.

Преимущество по сравнению с классическими цитогенетическими методами состоит в том, что микроделирование, дупликация или транслокации, которые не могут быть различимы классическим методом, также можно различать молекулярными методами.

Этот основной заголовок включает такие методы, как FISH (флуоресцентная гибридизация in situ), ACGH (сравнительная гибридизация массивов) и NGS (секвенирование следующего поколения).

При применении молекулярных цитогенетических методов в эмбрионе эмбрионы тестируют хромосомно перед переносом в матку.

По этой причине применение этих тестов в эмбрионе называется преимплантационным генетическим тестом (PGT) — генетический тест, проведенный перед имплантацией.

PGT-A в подзаголовках этого теста означает PGT для анеуплоидии.

Другими словами, является ли число хромосом в эмбрионе нормальным или нет, определяется методом PGT-A.

Таким образом, многие хромосомные проблемы, такие как трисомия 21 (синдром Дауна), распознаются до переноса эмбриона в матку.

При PGT-M, что является еще одной темой в методах PGT, моногенных, то есть можно различить отдельные генные заболевания, такие как СМА, талассемия и нейрофиброматоз, при тестировании эмбрионов перед переносом в парах с хромосомными транслокациями Метод PGT-SR. Можно добиться здоровых беременностей и живорождений.

Кому подходят молекулярные цитогенетические методы и генетические тесты, применяемые к эмбриону?

В процедурах ЭКО основная цель не только добиваться беременности, но и продолжать беременность со здоровьем и достичь здорового живого рода.

Для этого большое значение имеет выбор правого эмбриона перед переносом эмбриона.

В дополнение к таким методам, как культура бластоцист, использование эмбрионов, искусственный интеллект, преимплантационные генетические тесты и молекулярные цитогенетические методы могут быть использованы при отборе эмбрионов.

Все эти методы рекомендуются особенно следующим группам после извлечения подробной истории у пар:

Преклонный материнский возраст

История повторяющихся потерь беременности

Повторяющийся сбой ЭКО

Тяжелый мужской фактор

Известный носитель с одним геном

Известный носитель транслокации

История структурной аномалии плода или хромосомного заболевания в предыдущих беременностях

Конечно, все пары, кроме этой группы, могут сократить период наступления беременности, или, возможно, любой из этих методов может быть применен.

Что такое молекулярные цитогенетические методы?

всплеск

АКГ

НГС

Что такое рыба?

Метод флуоресцентной гибридизации (FISH) — это молекулярный метод, используемый для обнаружения специфических фрагментов ДНК в клетках.

В этом методе флуоресцентные красители используются для того, чтобы сделать ДНК, присутствующую внутри клеток, видимой.

Таким образом, можно определить, где находятся определенные фрагменты ДНК в клетках и насколько они плотны.

Метод FISH используется для контроля количества хромосом и структуры эмбрионов.

С помощью метода FISH можно оценить 3 или 5 пар хромосом из 23 пар хромосом, включая половые хромосомы.

Таким образом, можно диагностировать пол эмбриона и диагностику специальных синдромов, таких как моносомия или трисомия 13, 18, 21.

Кроме того, для оценки генетической структуры эмбриона и обеспечения отбора эмбрионов со здоровой хромосомной структурой у лиц с транслокационными носителями можно выбирать эмбрионы с применением регионоспецифических зондов и выбирать эмбрионы методом рыбы.

Для получения результатов биопсии, взятых методом рыбы, требуется около 24 часов.

Таким образом, можно производить свежие переносы в одном цикле после получения результатов.

Что такое метод CGH? / Что такое сравнительная геномная гибридизация?

Метод ACGH (Array Comparative Genomic Hybridization – сравнительная геномная гибридизация) представляет собой метод, используемый для изучения структуры и порядка ДНК в хромосомах клеток.

Этот метод может обеспечить численное и структурное исследование всех 23 пар хромосом в эмбрионе.

В основе метода лежит сравнение структуры ДНК эмбриона с известной структурой ДНК.

При лечении ЭКО метод ACGH используется для изучения структуры и порядка хромосом эмбрионов.

Структура и порядок хромосом эмбрионов способствуют развитию и здоровью эмбриона, а также прогрессу здоровья беременностей, которые будут происходить.

По этой причине самые здоровые и лучшие эмбрионы для развития выбираются с использованием метода ACGH во время отбора эмбрионов при лечении ЭКО.

Таким образом, повышается успех лечения ЭКО.

Сегодня использование NGS (секвенирование следующего поколения) выходит на первый план при изучении хромосомной структуры эмбрионов вместо ACGH.

Что такое НГС?

NGS (секвенирование следующего поколения) — это новейший метод среди методов преимплантационного генетического тестирования (PGT).

Благодаря методу секвенирования нового поколения у эмбрионов можно обнаружить структурные и числовые аномалии.

В этом методе сначала амплифицируют ДНК полученного образца, затем читаются последовательности ДНК, полученные путем ферментативного расщепления.

Таким образом, определяется общее количество показаний для каждого эмбриона.

Этот метод является более точным методом измерения, чем методы, используемые ранее, и скорость точности намного выше.

Благодаря этому методу возросла вероятность распознавания хромосомного мозаицизма у эмбрионов.

В результате теста NGS на эмбрионы дают 3 разных результата.

Эуплоид (нормальный): в эмбрионе 46 хромосом, а хромосомы структурно нормальные. Эти эмбрионы могут быть перенесены.

Ануплоид (ненормальный): количество хромосом в эмбрионе отличается от 46. Эти эмбрионы не переносятся.

Мозаика: в клетках, взятых из эмбриона, сосуществуют клетки с нормальными и аномальными числами хромосом. В зависимости от скорости мозаичности и типа, обнаруженных у эмбриона, пара может быть перенесена, если у них нет другого нормального эмбриона.

При переносе эмбрионов, осуществляемых без молекулярно-цитогенетических методов, если эмбрион структурно ауплоид, то есть аномальные, могут возникнуть три потенциальных результата, если эта ситуация неизвестна.

Эмбрион вообще не прикрепляется к матке, то есть беременность не может быть достигнута.

Конец беременности в ранние недели беременности, несмотря на привязанность эмбриона к матке

Беременность беременности, но выявление аномалий у плода в скрининговых или диагностических тестах в более поздние сроки беременности.

Чтобы избежать всех этих негативных последствий, многие пары сегодня часто обращаются к методам преимплантационной генетической диагностики.

В тех случаях, когда возраст матери — молодой и донорские ооциты, частота хромосомных аномалий крайне низкая, но ее нельзя полностью игнорировать.

По этой причине, помимо вышеупомянутых указаний, у пар есть шанс сделать свои эмбрионы по собственной воле.

Однако не следует забывать, что эти тесты не проводят различий между хромосомными заболеваниями, и для скрининга этих заболеваний следует проводить дополнительные тесты.

При применении метода NGS результаты получаются примерно через 14 дней.

По этой причине после процедуры биопсии эмбрионы замораживаются, и ожидается, что результаты будут получены.

При достижении результата вводится период подготовки, который занимает около 20 дней для переноса замороженных эмбрионов в матку.

Когда внутриматочный препарат завершен, эмбрионы, которые, как известно, имеют здоровую хромосомную структуру, растворяются и переносятся в матку.