Méthodes de Cytogénétique Moléculaire

Quelles sont les méthodes cytogénétiques moléculaires ?

La cytogénétique moléculaire est l'examen numérique et structural des chromosomes.

Son avantage par rapport aux méthodes cytogénétiques classiques est que la microdélétion, la duplication ou les translocations qui ne peuvent être distinguées par la méthode classique peuvent également être distinguées par des méthodes moléculaires.

Cette rubrique principale comprend des méthodes telles que le poisson (hybridation in situ fluorescente), l'ACGH (l'hybridation génomique comparative du tableau) et le NGS (séquençage de génération suivante).

Avec l'application de méthodes cytogénétiques moléculaires dans l'embryon, les embryons sont testés chromosomiquement avant d'être transférés dans l'utérus.

Pour cette raison, l'application de ces tests dans l'embryon est appelée test génétique préimplantatoire (PGT) - test génétique effectué avant l'implantation.

PGT-A dans les sous-positions de ce test signifie PGT pour l'aneuploïdie.

En d'autres termes, la question de savoir si le nombre de chromosomes dans l'embryon est normal ou non est déterminé par la méthode PGT-A.

Ainsi, de nombreux problèmes chromosomiques tels que la trisomie 21 (syndrome de Down) sont reconnus avant que l'embryon ne soit transféré dans l'utérus.

Avec le PGT-M, qui est un autre sujet des méthodes PGT, monogénique, c'est-à-dire des maladies à gène unique telles que la SMA, la thalassémie et la neurofibromatose, peut être distinguée, tandis que les embryons sont testés avant le transfert en couple avec des translocations chromosomiques par Méthode PGT-SR. Il est possible d'atteindre des grossesses saines et des naissances vivantes.

Pour qui les méthodes cytogénétiques moléculaires et les tests génétiques appliqués à l'embryon sont-ils adaptés ?

Dans les procédures de FIV, l'objectif principal n'est pas seulement d'atteindre la grossesse, mais aussi de poursuivre la grossesse avec la santé et d'atteindre un accouchement sain.

Pour cela, la sélection du bon embryon avant le transfert d'embryon est d'une grande importance.

En plus des techniques telles que la culture du blastocyste, l'utilisation d'embryoscopes, l'intelligence artificielle, les tests génétiques préimplantatoires et les méthodes cytogénétiques moléculaires peuvent être utilisés dans la sélection des embryons.

Toutes ces méthodes sont particulièrement recommandées aux groupes suivants après avoir pris l'historique détaillé des couples :

Âge maternel avancé

Antécédents de perte de grossesse récurrente

Défaillance récurrente de la FIV

Facteur masculin sévère

un porteur de la maladie à gène unique connu

Un transporteur de translocation connu

Antécédents d'anomalie structurelle fœtale ou de maladie chromosomique dans les grossesses précédentes

Bien sûr, tous les couples autres que ce groupe peuvent raccourcir la période d'atteinte de la grossesse ou, éventuellement, l'une de ces méthodes peut être appliquée.

Quelles sont les méthodes cytogénétiques moléculaires ?

éclaboussure

ACGH

NGS

Qu'est-ce que le poisson ?

La méthode d'hybridation situ (FISH) de Fluorescent est une technique moléculaire utilisée pour détecter des fragments d'ADN spécifiques dans les cellules.

Dans cette méthode, des colorants fluorescents sont utilisés pour rendre visible l'ADN présent à l'intérieur des cellules.

De cette manière, on peut déterminer où se trouvent certains fragments d'ADN dans les cellules et leur dense.

La méthode FISH est utilisée pour contrôler le nombre de chromosomes et la structure des embryons.

Avec la méthode FISH, il est possible d'évaluer 3 ou 5 paires de chromosomes à partir de 23 paires de chromosomes, y compris les chromosomes sexuels.

Ainsi, il est possible de diagnostiquer le sexe de l'embryon et le diagnostic de syndromes spéciaux tels que la monosomie ou la trisomie 13, 18, 21.

De plus, afin d'évaluer la structure génétique de l'embryon et d'assurer la sélection d'embryons avec une structure chromosomique saine chez les individus avec des porteurs de translocation, il est possible de choisir des embryons à l'aide de sondes spécifiques à une région et de choisir des embryons avec la méthode FISH.

Il faut environ 24 heures pour obtenir les résultats des biopsies prises avec la méthode FISH.

Par conséquent, il est possible d'effectuer de nouveaux transferts dans le même cycle après l'obtention des résultats.

Quelle est la méthode CGH ? / Qu'est-ce que l'hybridation génomique comparative ?

La méthode ACGH (Array Comparative Genomic Hybridization – Comparative Genomique Hybridation) est une technique utilisée pour examiner la structure et l'ordre de l'ADN dans les chromosomes des cellules.

Cette méthode peut fournir un examen numérique et structurel des 23 paires de chromosomes dans l'embryon.

La base de la méthode est basée sur la comparaison de la structure de l'ADN de l'embryon avec la structure d'ADN connue.

Dans le traitement de la FIV, la méthode ACGH est utilisée pour examiner la structure et l'ordre des chromosomes des embryons.

La structure et l'ordre des chromosomes des embryons contribuent au développement et à la santé de l'embryon, ainsi qu'aux progrès sanitaires des grossesses qui se produiront.

Pour cette raison, les embryons les plus sains et les meilleurs développement sont sélectionnés en utilisant la méthode ACGH lors de la sélection des embryons dans le traitement de la FIV.

Ainsi, le taux de réussite du traitement de FIV est tenté d'être augmenté.

Aujourd'hui, l'utilisation du NGS (séquençage de la prochaine génération) est apparue au premier plan dans l'examen de la structure chromosomique des embryons au lieu de l'ACGH.

Qu'est-ce que NGS ?

NGS (Next Generation Sequencing) est la dernière technique connue parmi les méthodes de test génétique préimplantatoire (PGT) aujourd'hui.

Grâce à la technique de séquençage de nouvelle génération, il est possible de détecter les anomalies structurelles et numériques des embryons.

Dans cette technique, premièrement, l'ADN de l'échantillon obtenu est amplifié, puis les séquences d'ADN obtenues par décomposition enzymatique sont lues.

Ainsi, le nombre total de lectures pour chaque embryon est déterminé.

Cette méthode est une technique de mesure plus précise que les méthodes utilisées auparavant et le taux de précision est beaucoup plus élevé.

Grâce à cette méthode, les chances de reconnaissance du mosaïsme chromosomique dans les embryons ont également augmenté.

À la suite du test NGS, 3 résultats différents sont donnés aux embryons.

Euploïde (normal) : Il y a 46 chromosomes dans l'embryon et les chromosomes sont structurellement normaux. Ces embryons peuvent être transférés.

Aneuploïde (anormal) : Le nombre de chromosomes dans l'embryon est différent de 46. Ces embryons ne peuvent pas être transférés.

Mosaïque : Dans les cellules échantillonnées à partir de l'embryon, les cellules avec des nombres de chromosomes normaux et anormaux coexistent. Selon le taux de mosaïque et le type détectés dans l'embryon, le couple peut être transféré s'il n'a pas d'autre embryon normal.

Dans les transferts d'embryons effectués sans méthodes cytogénétiques moléculaires, si l'embryon est structurellement aneuploïde, c'est-à-dire anormal, trois résultats potentiels peuvent être rencontrés si cette situation n'est pas connue.

L'embryon ne s'attache pas du tout à l'utérus, c'est-à-dire que la grossesse ne peut pas être atteinte.

Fin de la grossesse au début des semaines de gestation, malgré l'attachement de l'embryon à l'utérus

Grossesse de grossesse, mais détection d'anomalies chez le fœtus lors de tests de dépistage ou de diagnostic au cours des semaines de gestation ultérieures.

Pour éviter toutes ces conséquences négatives, de nombreux couples se tournent souvent vers les méthodes de diagnostic génétique préimplantatoire.

Dans les cas où l'âge maternel est jeune et où les ovocytes de donneurs sont utilisés, le taux d'anomalie chromosomique est extrêmement faible, mais ne peut être complètement ignoré.

Pour cette raison, en dehors des indications susmentionnées, les couples ont la chance de faire faire leurs embryons de leur propre gré.

Cependant, il ne faut pas oublier que ces tests ne font pas de distinction entre les maladies chromosomiques et les tests supplémentaires pour dépister ces maladies.

Lorsque la technique NGS est appliquée, les résultats sont obtenus en environ 14 jours.

Pour cette raison, après la procédure de biopsie, les embryons sont congelés et les résultats devraient être obtenus.

Lorsque le résultat est atteint, une période de préparation qui prend environ 20 jours est saisie pour le transfert d'embryons congelés dans l'utérus.

Lorsque la préparation intra-utérine est terminée, les embryons connus pour avoir une structure chromosomique saine sont dissous et transférés dans l'utérus.