Molekulare zytogenetische Methoden

Was sind molekulare zytogenetische Methoden?

Molekulare Zytogenetik ist die numerische und strukturelle Untersuchung von Chromosomen.

Der Vorteil gegenüber klassischen zytogenetischen Methoden besteht darin, dass Mikrodeletion, Duplizierung oder Translokationen, die nicht durch die klassische Methode unterschieden werden können, auch durch molekulare Methoden unterschieden werden können.

Diese Hauptüberschrift umfasst Methoden wie FISH (fluoreszierende in situ-Hybridisierung), ACGH (Array vergleichende genomische Hybridisierung) und NGS (Sequencing der nächsten Generation).

Mit der Anwendung molekularer zytogenetischer Methoden im Embryo werden die Embryonen chromosomal getestet, bevor sie in die Gebärmutter überführt werden.

Aus diesem Grund wird die Anwendung dieser Tests im Embryo als Präimplantationsgenetik (PGT) bezeichnet - Gentest vor der Implantation.

PGT-A in den Unterpositionen dieses Tests bedeutet PGT für Aneuploidie.

Mit anderen Worten, ob die Chromosomenzahl im Embryo normal ist oder nicht, wird durch das PGT-A-Verfahren bestimmt.

So werden viele Chromosomenprobleme wie Trisomie 21 (Down-Syndrom) erkannt, bevor der Embryo in die Gebärmutter überführt wird.

Mit PGT-M, einem weiteren Thema in den PGT-Methoden, können monogene, dh einzelne Generkrankungen wie SMA, Thalassämie und Neurofibromatose unterschieden werden, während Embryonen vor dem Transfer in Paaren mit chromosomalen Translokationen durch getestet werden PGT-SR-Methode. Es ist möglich, gesunde Schwangerschaften und Lebendgeburten zu erreichen.

Für wen sind molekularzytogenetische Methoden und Gentests am Embryo geeignet?

Bei IVF-Verfahren besteht das Hauptziel nicht nur darin, eine Schwangerschaft zu erreichen, sondern auch die Schwangerschaft mit Gesundheit fortzusetzen und eine gesunde Lebendgeburt zu erreichen.

Dabei ist die Auswahl des richtigen Embryos vor dem Embryonentransfer von großer Bedeutung.

Neben Techniken wie Blastozystenkultur, Embryoskopgebrauch, künstlicher Intelligenz, Präimplantations-Gentests und molekularen zytogenetischen Methoden können bei der Auswahl von Embryonen eingesetzt werden.

Alle diese Methoden werden insbesondere den folgenden Gruppen empfohlen, nachdem sie eine detaillierte Vorgeschichte von Paaren übernommen haben:

Fortgeschrittenes mütterliches Alter

Vorgeschichte des wiederkehrenden Schwangerschaftsverlusts

Wiederkehrender IVF-Fehler

Schwerer männlicher Faktor

ein bekannter Träger für einzelne Genkrankheiten

ein bekannter Translokationsträger

Eine Vorgeschichte von fetalen strukturellen Anomalien oder Chromosomenerkrankungen bei früheren Schwangerschaften

Natürlich können alle anderen Paare als diese Gruppe den Zeitraum der Schwangerschaft verkürzen oder gegebenenfalls kann jede dieser Methoden angewendet werden.

Was sind molekulare zytogenetische Methoden?

Spritzen

ACGH

NGS

Was ist Fisch?

Die Fluoreszenz-Situ-Hybridisierungsmethode (FISH) ist eine molekulare Technik, die zum Nachweis spezifischer DNA-Fragmente in Zellen verwendet wird.

Bei diesem Verfahren werden fluoreszierende Farbstoffe verwendet, um die in den Zellen vorhandene DNA sichtbar zu machen.

Auf diese Weise kann festgestellt werden, wo sich bestimmte DNA-Fragmente in den Zellen befinden und wie dicht sie sind.

Die FISH-Methode wird verwendet, um die Chromosomenzahl und -struktur von Embryonen zu kontrollieren.

Mit der FISH-Methode ist es möglich, 3 oder 5 Chromosomenpaare aus 23 Chromosomenpaaren, einschließlich Geschlechtschromosomen, zu bewerten.

Somit ist es möglich, das Geschlecht des Embryos und die Diagnose spezieller Syndrome wie Monosomie oder Trisomie 13, 18, 21 zu diagnostizieren.

Um die genetische Struktur des Embryos zu bewerten und die Auswahl von Embryonen mit gesunder Chromosomenstruktur bei Personen mit Translokationsträgern zu gewährleisten, ist es außerdem möglich, Embryonen mit regionenspezifischen Sonden und Embryonen mit der FISH-Methode auszuwählen.

Es dauert ungefähr 24 Stunden, um die Ergebnisse von Biopsien mit der Fischmethode zu erhalten.

Daher ist es möglich, neue Übertragungen im selben Zyklus durchzuführen, nachdem die Ergebnisse erhalten wurden.

Was ist die CGH-Methode? / Was ist vergleichende genomische Hybridisierung?

Die ACGH-Methode (Array Comparative Genomic Hybridization – Comparative Genomic Hybridization) ist eine Technik, die verwendet wird, um die Struktur und Ordnung der DNA in den Chromosomen von Zellen zu untersuchen.

Diese Methode kann numerische und strukturelle Untersuchung aller 23 Chromosomenpaare im Embryo ermöglichen.

Grundlage des Verfahrens ist der Vergleich der DNA-Struktur des Embryos mit der bekannten DNA-Struktur.

Bei der IVF-Behandlung wird die ACGH-Methode verwendet, um die Struktur und Reihenfolge der Chromosomen der Embryonen zu untersuchen.

Die Struktur und Ordnung der Chromosomen der Embryonen tragen zur Entwicklung und Gesundheit des Embryos sowie zum gesundheitlichen Fortschritt der auftretenden Schwangerschaften bei.

Aus diesem Grund werden die gesündesten und besten Entwicklungsembryonen nach der ACGH-Methode bei der Auswahl von Embryonen in der IVF-Behandlung ausgewählt.

Somit wird versucht, die Erfolgsrate der IVF-Behandlung zu erhöhen.

Die Verwendung von NGS (Next Generation Sequencing) ist heute bei der Untersuchung der chromosomalen Struktur von Embryonen anstelle von ACGH in den Vordergrund gerückt.

Was ist NGS?

NGS (Next Generation Sequencing) ist heute die neueste bekannte Technik unter den Methoden der Präimplantationsgenetik (PGT).

Dank der Sequenzierungstechnik der neuen Generation ist es möglich, strukturelle und numerische Anomalien in Embryonen zu erkennen.

Bei dieser Technik wird zunächst die DNA der erhaltenen Probe amplifiziert, dann werden die durch enzymatischen Zerbrechen erhaltenen DNA-Sequenzen gelesen.

Somit wird die Gesamtzahl der Messwerte für jeden Embryo bestimmt.

Diese Methode ist eine genauere Messtechnik als die zuvor verwendeten Methoden und die Genauigkeitsrate ist viel höher.

Dank dieser Methode hat sich auch die Möglichkeit der Erkennung von chromosomalen Mosaiken in Embryonen erhöht.

Als Ergebnis des NGS-Tests werden den Embryonen 3 verschiedene Ergebnisse gegeben.

Euploid (normal): Es gibt 46 Chromosomen im Embryo und die Chromosomen sind strukturell normal. Diese Embryonen können übertragen werden.

Aneuploid (abnormal): Die Anzahl der Chromosomen im Embryo unterscheidet sich von 46. Diese Embryonen können nicht übertragen werden.

Mosaik: In Zellen, die aus dem Embryo entnommen wurden, existieren Zellen mit normalen und abnormalen Chromosomenzahlen nebeneinander. Abhängig von der im Embryo erfassten Mosaikrate und dem Typ kann das Paar übertragen werden, wenn es keinen anderen normalen Embryo hat.

Bei Embryonentransfers ohne molekulare zytogenetische Verfahren kann, wenn der Embryo strukturell aneuploid ist, dh abnormal, drei mögliche Ergebnisse auftreten, wenn diese Situation nicht bekannt ist.

Der Embryo haftet überhaupt nicht an der Gebärmutter, das heißt, eine Schwangerschaft kann nicht erreicht werden.

Ende der Schwangerschaft in den frühen Schwangerschaftswochen, trotz der Anhaftung des Embryos an die Gebärmutter

Schwangerschaft der Schwangerschaft, aber Erkennung von Anomalien im Fötus in Screening- oder Diagnosetests in späteren Schwangerschaftswochen.

Um all diese negativen Konsequenzen zu vermeiden, wenden sich heute viele Paare häufig an Methoden der Präimplantationsdiagnostik.

In Fällen, in denen das mütterliche Alter jung ist und Spender-Oozyten verwendet werden, ist die Chromosomen-Abnormalitätsrate extrem niedrig, kann aber nicht vollständig ignoriert werden.

Aus diesem Grund haben Paare abgesehen von den oben genannten Indikationen die Chance, ihre Embryonen nach eigenem Willen machen zu lassen.

Es sollte jedoch nicht vergessen werden, dass diese Tests nicht zwischen Chromosomenerkrankungen unterscheiden und zusätzliche Tests durchgeführt werden sollten, um diese Krankheiten zu untersuchen.

Wenn die NGS-Technik angewendet wird, werden die Ergebnisse in etwa 14 Tagen erhalten.

Aus diesem Grund werden die Embryonen nach dem Biopsieverfahren eingefroren und die Ergebnisse werden voraussichtlich erhalten.

Wenn das Ergebnis erreicht ist, wird eine etwa 20 Tage dauernde Vorbereitungszeit für die Übertragung von gefrorenen Embryonen in die Gebärmutter eingegeben.

Wenn die intrauterine Präparation abgeschlossen ist, werden die Embryonen, von denen bekannt ist, dass sie eine gesunde Chromosomenstruktur haben, aufgelöst und in die Gebärmutter übertragen.